Pemimpin klasemen MotoGP 2025, Marc Marquez, turun ke lintasan 15 menit setelah pitlane dibuka. Ia menunggangi motor yang sama dengan yang digunakan saat meraih kemenangan di Grand Prix Aragon. Dalam sesi latihan ini, Marquez mencatatkan waktu tercepat (1:46,771) dan berhasil berada di puncak. Setelah putaran pertama, Marquez kembali ke pit box Ducati, di mana fairing dengan paket aero baru telah menunggunya yang berwarna hitam, kontras dengan motor merahnya.
Berdasarkan peraturan, Ducati hanya dapat melakukan satu pembaruan aerodinamika fairing per musim. Hari itu, mereka sedang menguji pembaruan ini yang direncanakan bisa digunakan mulai dari GP Italia dan tak ikut serta. Ducati menyewa sirkuit Barcelona pada hari Rabu dan Kamis untuk melakukan tes privat dengan Michele Pirro, yang kemungkinan akan mengerjakan indikasi Marc di area penting ini.
Marquez berhasil mencetak waktu terbaiknya menjadi 1:45,927, mendekati rekor pole di sirkuit tersebut yang dia buat sendiri pada hari Sabtu. Pada sesi latihan itu, Francesco Bagnaia juga turut serta dengan motor konvensional dalam hal aerodinamika, mencatatkan waktu tercepat ketiga (1:46,571). Dia berupaya memahami bagaimana cakram rem berukuran 355 mm menunjang peningkatan performa. Ducati berencana untuk menggunakan aerodinamika baru dan bagian dari motor yang ditinggalkan Pecco. Ada usaha untuk mengevaluasi potensi peningkatan performa dengan melibatkan kedua pembalap Ducati itu.
